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豬瘟病毒檢測(cè)需要哪些試劑?
更新時(shí)間:2022-03-21 點(diǎn)擊量:832
  豬瘟病毒檢測(cè)由于CSFV的高致病力和高致死率,它已給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失。豬感染高致病力毒株后在潛伏期就可以造成傳染,經(jīng)歷急性豬瘟或亞急性豬瘟臨床癥狀的豬在出現(xiàn)癥狀前大量排毒,但耐過后的豬只體內(nèi)有明顯的CSFV抗體,且不再排毒。感染溫和性毒株的豬呈慢性感染,在病死前會(huì)長(zhǎng)期或間歇性地排毒。懷孕母豬可以通過胎盤感染胎兒導(dǎo)致流產(chǎn)、木乃伊化或產(chǎn)出弱豬、畸形胎等。先天性感染低毒力病毒的結(jié)果是產(chǎn)出持續(xù)性感染的仔豬,仔豬出現(xiàn)免疫耐受,不表現(xiàn)任何癥狀向外排毒。豬也有可能感染BVDV或BDV。盡管這些感染通常呈溫和過程并且是自限性的,但有效的將它們同豬瘟病毒區(qū)分是很重要的。
 
  豬瘟病毒檢測(cè)的技術(shù)原理:
 
  用來檢測(cè)豬血清或血漿中豬瘟病毒抗體的檢測(cè)試劑盒。該試劑盒是用豬瘟病毒抗原包被的微量反應(yīng)板,利用阻斷ELISA原理來檢測(cè)豬血清或血漿中豬瘟病毒抗體。如果被檢樣品中存在豬瘟病毒抗體,它們就會(huì)阻斷辣根過氧化物酶標(biāo)記(HRPO)的抗豬瘟病毒的單克隆抗體。單克隆抗體與豬瘟病毒抗原的結(jié)合可以通過辣根過氧化物酶與底物的顯色程度進(jìn)行判定,即用酶標(biāo)儀在單波長(zhǎng)450nm或雙波長(zhǎng)450nm與620nm測(cè)定該反應(yīng)體系的吸光度。當(dāng)被檢樣品中含有豬瘟病毒抗體(陽性結(jié)果)時(shí),顯色就會(huì)變淺,當(dāng)被檢樣品中不含有抗豬瘟病毒抗體(陰性結(jié)果)時(shí),顯色就會(huì)變深。樣本的阻斷率可以通過450nm波長(zhǎng)樣本吸光度與陰性對(duì)照吸光度的比值來確定。
 
  豬瘟病毒檢測(cè)的試劑:
 
  一個(gè)ELISA反應(yīng)板可以檢測(cè)92份樣品(另加兩個(gè)對(duì)照,每個(gè)雙孔),或46個(gè)未知樣品,每個(gè)樣品加雙孔。雙孔檢測(cè)法有利于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 
  1. 用豬瘟病毒抗原包被的ELISA反應(yīng)板
 
  2. 洗滌液(10×)
 
  3. 陰性對(duì)照
 
  4. 陽性對(duì)照
 
  5. 樣品稀釋液
 
  6. 辣根過氧化物酶標(biāo)記(HRPO)的抗豬瘟病毒的單克隆抗體
 
  7. TMB底物
 
  8. 終止液

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